Československý transplantační kongres
 |
|
1. československý transplantační kongres 2. československý transplantační kongres |
Konferenční abstrakta 2008
Abstrakta přednášek – sekce lékařů
STANOVENIE MRNA GRANZÝMU B, PERFORÍNU, FASL A COXP3 V BUNKÁCH MOČU U PACIENTOV PO TRANSPLANTÁCII OBLIČKY
1Z. Žilinská, 2E. Bandžuchová, 2E. Bilčíková, 1M. Chrastina, 2D. Kuba
1Urologická klinika s Centrom pre transplantáciu obličiek, FN Bratislava, 2Slovenské centrum orgánových transplantácií SZU, Bratislava
• Urologická klinika, FN Bratislava pracovisko Kramáre, Limbova 5, 833 03 Bratislava
Napriek pokrokom v imunosupresii je akútna rejekčná epizóda stále častou komplikáciou, ktorá zhoršuje dlhodobú prognózu štepu. Cytolytické T lymfocyty sú cez apoptózu (FAS-FASL, COXP3) a cez vytáranie pórov a fragmentáciu (granzým B GR_B a perforín PRF) zodpovedné za stratu štepu. Cieľom práce bolo stanoviť hladiny mRNA jednotlivých mediátorov imunologickej reakcie v bunkách moču a sledovať ich expresiu v skupinách pacientov s akútnou rejekciou, chronickou rejekciou a neimunologickými príčinami zhoršenej funkcie transplantovanej obličky.
Do štúdie bolo zaradených 72 pacientov, 45 mužov, 27 žien. Skupinu s rejekciou tvorilo 21 pacientov (15 pac biopticky verifikovaná, 6 pac. bez biopsie), skupinu s chronickou rejekciou 8 pacientov, neimunologické príčiny zhoršenej funkcie boli u 21 pacientov a kontrolnú skupinu s dobrou funkciou štepu tvorilo 22 pacientov. Moč bol po odbere scentrifugovaný, z peletu bola izolovaná RNA (TRIZOL), vykonali sme reverznú transkripciu a transkripty sme pre jednotlivé gény amplifikovali pomocou real time PCR. Ako internú kontrolu sme použili GAPDH. Porovnávali sme relatívnu expresiu. Výsledky sme porovnali T-testom, za štatisticky významnú sme považovali hodnotu p<0.05.
Namerali sme nasledovné výsledky: Kontrola GR_B 0.91* PRF 3.55* FASL 1.56 COXP3 1.13* Chron.rej. GR_B 1.49 PRF 7.76 FASL 3.51 COXP3 1.78 Akutna rej. GR_B 10.13* PRF 15.49* FASL 7.22 COXP3 7.21* Neimunol. GR_B 0.60* PRF 2.69* FASL 2.42 COXP3 2.77 Uvádzaná je stredná hodnota, * p<0.05.
V našom súbore sme zistili zvýšenú expresiu mRNA u akútnej rejekcie vo všetkých meraných parametroch, ale štatisticky významná bola len u granzýmu, perforínu a COX P3. Štatistickú významnosť ovplyvňuje veľký rozptyl nameraných hodnôt.Metóda merania expresie mRNA je použiteľná na stanovenie markerov rejekcie. Je citlivá na kvalitu RNA a pri jej interpretácii je potrebné zohľadňovať kliniku pacienta a brať do úvahy ďalšie procesy, ktoré aktivujú imunitný systém. Naše skúsenosti ju klasifikujú ako pomocnú diagnostickú metódu.