Československý transplantační kongres
 |
|
1. československý transplantační kongres 2. československý transplantační kongres |
Konferenční abstrakta 2006
Abstrakta přednášek – sekce lékařů
MOŽNOSTI DETEKCE DÁRCOVSKÉ DNA V PLASMĚ U PACIENTŮ PO TRANSPLANTACI SRDCE
Vymětalová Y.1, Bohuslavová R.2, Hubáček J.2, Kocík M.3, Málek I.1
1Klinika kardiologie IKEM, Praha, 1Centrum experimentální mediciny IKEM, Praha, 1IV. intení klinikaVFN, Praha
V současné době je referenční diagnostiky akutní rejekce (AR) štěpu po ortotopické transplantaci srdce (OTS) endomyokardiální biopsie (EMB). Cílem naše práce je posoudit možnosti detekce nebuněčné DNA dárcovského původu v krvi příjemců OTS pomocí využití DNA typizace v sex-specifickém úseku chromosomu Y a event. posouzení vztahu mezi přítomnosti vDNA dárcovského původu v séru příjemce OTS a výskytem AR. Metodika:
Provedli jsme 24 vyšetření vzorků periferní krve u třech příjemců OTS ženského pohlaví. U všech příjemců v den EMB byl proveden odběr krve. Doba sledování byla první 3 měsíce po OTS. DNA byla izolována z recentrifugované plasmy komerčním kitem firmy Macherey-Nagel. Analýza genu pro interleukin-6 pomocí řetězové polymerázové reakce (PCR) byla použita pro analýzu úspěšnosti DNA izolace. Sex-specifický úsek chromozómu Y jsme amplifikovali pomocí nested PCR a produkty detekovali elektroforeticky a „real time PCR“. Výsledky:
U pac. A, která obdržela štěp od dárce mužského pohlaví, během prvních 28 dnů po OTS byla stanovena přítomnost Y-chromosomu. Akutní rejekce štěpu však současně nebyla histologicky prokázána. U pac. B, která obdržela srdce od dárce ženského pohlaví, při první kontrole byl detekován Y-chromosom v plasmě. Také histologicky byla prokázána akutní rejekce (Banff 2). Y-chromosom byl také přítomen v dárcovském štěpu před OTS. U pac. C, která také obdržela srdce od dárce ženského pohlaví nebyla stanovena přítomnost Y-chromosomu v plazmě, přesto že byla histologicky prokázána akutní rejekce (Banff 3). Závěry:
Podařilo se prokázat, že pomocí nested PCR metody lze provést detekci dárcovské DNA v plasmě pacientů po OTS. Zatím se nepodařilo přesně učit souvislost přítomnosti Y-chromosomu v plasmě příjemce se vznikem akutní rejekce. Drojem Y-chromosomu jak se zdá nemusí být pouze srdeční štěp, ale také krevní transfuse nebo těhotenství.
Práce podpořena IGA MZ ČR č. NR 8547-3/2005