Československý transplantační kongres
 |
|
1. československý transplantační kongres 2. československý transplantační kongres |
Konferenční abstrakta 2008
Abstrakta přednášek – sekce lékařů
VLIV PŘÍTOMNOSTI BK VIROVÉ REPLIKACE NA PROFIL IMUNITNÍ ODPOVĚDI V TRANSPLANTOVANÉ LEDVINĚ
1E. Novotná, 1I. Brabcová, 2Š. Bandúr, 1P. Hřibová, 3J. Skibová, 1,2O. Viklický
1Transplantační laboratoř IKEM, Praha, 2Klinika nefrologie Transplantačního centra IKEM, Praha, 3Oddělení lékařské statistiky IKEM, Praha
• Transplantační laboratoř IKEM Vídeňská 1958/9 Praha 4 140 21 Czech Republic
Lidský polyomavirus typu I, BK virus (BKV) je příčinou vzniku nefropatie asociované s polyomavirovou infekcí (PVAN) u 1-10 % pacientů TPL. Cílem této práce bylo zjistit, zda existuje vztah mezi mírou exprese genů účastnících se imunitní odpovědi, v bioptické tkáni TPL a přítomností BK virové replikace v moči pacientů.
U 109 nemocných po TPL byly odebírány vzorky séra a moči za účelem absolutní kvatifikace BK DNA virurie a viremie pomocí AQ Real Time PCR první pooperační den a dále v M1, M3, M6, M9, a M12. Expresní profil 96 genů imunitní odpovědi byl sledován v tkáni štěpu z protokolární biopsie ve 3. měsíci. Celková RNA izolovaná z části biopsie byla reversní transkripcí přepsána do cDNA a rozdíly v profilu imunitní odpovědi byly ve vzorcích sledovány relativní kavtifikací za použití komerčně navržené Taq-Man immune low-density array(TLDA)(Applied Biosystems) metodou 2-DDCt. Gen GAPDH byl použit jako vnitřní kontrola, kalibračníim vzorkem byla cDNA ze zdrave ledviny. Míra exprese genů v tkáni byla korelována s virovou replikací v moči a v krvi a s klinickými parametry.
První den po TPL byl v moči u 2(2 %) pacientů zjištěn počet kopií viru >107/ml. V 1.měsíci byl zachycen významně zvýšenou replikací v moči u 8 pacientů(10 %), ve 3.měsíci u 13 pacientů(18 %), v 6.měsíci u 5 pacientů(10%) a v 9.měsíci u 3 pacientů(18%). U 13 ze 17 pacientů s BK DNA virurií více než 106 (kopii/ml) ve 3.měsíci po TPL byl získán vzorek mRNA z protokolární biopsie. Jako negativní kontrola byla vybrána skupina 6 pacientů s počtem BK DNA kopii/ml 0 ve všech odběrech do 3. měsíce. Mezi sledovanými skupinami byl hledán rozdíl v úrovni exprese 96 genů kaskády imunitní odpovědi. Pacienti vykazující BKV pozitivitu v moči měli vyšší míru exprese mRNA pro IL-6 (p<0,05), TGF-ß(p<0,05) a STAT3 (p=0,07). Množství mRNA ostatních sledovaných genů se u pozitivních a negativních pacientu nelišilo. Zároveň pacienti s vysokým počtem BK DNA v moči měli ve 3. měsíci zvýšené CMV-IgM (p<0.01) ve 3. Ostatní sledované klinické parametry (věk, sCr, GFR-MDRD, EBV EA IgG, EBV VCA IgG , EBV VCA IgM, EBNA IgG, CMV IgG, CMV EA pp65, typ imunosuprese, rejekce) se mezi skupinami nelišily.
Nemocní se zvýšenou polyoma-BK virurií vykazují vyšší míru exprese genů pro cytokiny TGF-ß, IL-6 a STAT3 v tkáni štěpu. Je tedy možno předpokládat, že imunitní reakce na přítomnost BK viru bez ohledu na absenci manifestní BKV nefropatie může urychlit vznik jinak nespecifické fibrosy a následně dysfunkci štěpu.