Československý transplantační kongres
 |
|
1. československý transplantační kongres 2. československý transplantační kongres |
Konferenční abstrakta 2008
Abstrakta posterů – sekce lékařů
B-LYMFOCYTOVÝ CROSS-MATCH PRED TRANSPLANTÁCIOU OBLIČKY
S. Chreňová
Slovenské centrum orgánových transplantácií
• Slovenské centrum orgánových transplantácií Slovenská zdravotnícka univerzita Limbová 12 Bratislava
Lymfocytový cross-match (CXM) je stále nenahraditeľným testom na vyšetrenie donor-špecifickej imunity pred transplantáciou obličky. Zavedenie metódy prietokovej cytometrie umožnilo detekciu nízkotitrových protilátok, ako aj protilátok nezávislých od komplementu, ktoré sú klinicky relevantné. Táto metóda navyše umožňuje súčasnú identifikáciu protilátok reagujúcich s T alebo B lymfocytmi, bez potreby ich predchádzajúcej separácie. Jej nevýhodou je absencia jednotného postupu a tiež interpretácie získaných výsledkov. Naším cieľom bola preto zavedenie optimálneho laboratórneho postupu, stanovenie hranice pozitivity na základe doterajších výsledkov, analýza problému interpretácie pozitívneho výsledku v súvislosti s ďalšími doplňujúcimi vyšetreniami a aplikácia doterajších skúseností v praxi.
Od r. 2004 bolo v laboratóriu SCOT vyšetrených spolu 23 cross-match testov s B-lymfocytmi na prietokovom cytometri Coulter EPICS XL. Jednalo sa o 21 príbuzenských párov. Z týchto párov bolo vybratých 10 pacientov bez známej predchádzajúcej senzibilizácie, ktorých výsledky spolu s výsledkami piatich zdravých darcov, vyšetrených jednak s autológnymi ako aj s alogénnymi lymfocytmi, boli použité na určenie empirickej hranice pozitivity testu. Štatistickým parametrom na hodnotenie pozitivity testu bol pomer hodnoty mediánu fluorescencie vyšetrovanej vzorky a negatívnej kontroly. Ako negatívna kontrola bolo použité sérum od zdravého darcu krvi mužského pohlavia s krvnou skupinou AB, bez cytotoxicity v LCT-teste. Pozitívna kontrola bola získaná zmiešaním sér od 10-15 vysokosenzibilizovaných pacientov (PRA >80%).
Porovnaním výsledkov od zdravých darcov a nesenzibilizovaných pacientov sme stanovili hranicu pozitivity B-FCXM testu na hodnotu 2-násobku mediánu fluorescencie negatívnej kontroly, oblasť tzv. šedej zóny (hraničnej pozitivity) v rozpätí hodnôt 2,0 -3,0 -násobku mediánu fluorescencie negatívnej kontroly. V jednom z troch prípadov jednoznačne pozitívneho výsledku B-CXM pri súčasnej negativite T-CXM bola potvrdená prítomnosť izolovaných protilátok proti HLA-antigénom II.triedy metódou Flow PRA v imunogenetickom laboratóriu IKEM-u v Prahe.
B-lymfocytový cross-match je v podmienkach absencie HLA-špecifických metód v rutinnom testovaní PRA pacientov čakajúcich na transplantáciu obličky spoľahlivou a dostupnou metódou na detekciu donor-špecifických protilátok II.triedy. Je vhodný na predtransplantačné vyšetrenie pred plánovanou transplantáciou od žijúceho darcu.